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RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基配制等詳細(xì)說(shuō)明書

更新時(shí)間:2014-10-24      瀏覽次數(shù):7241

RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基是zui常用的一種培養(yǎng)基,由 Moore et al 在1967 年為人的白血球細(xì)胞開發(fā)的,并以他所在的研究所(RoswellPark Memorial Institute)而命名。目前用于多種動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng)。

高壓滅菌型是該培養(yǎng)基的熱穩(wěn)定配方,可保證其營(yíng)養(yǎng)成份在高壓高熱中不受影響。該配方中不含 L-谷氨酰胺及碳酸氫鈉,需在高溫滅菌后添加。

產(chǎn)品型號(hào)

RPMI1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含 L-谷氨酰胺,不含碳酸氫鈉

RPMI1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含 L-谷氨酰胺,不含酚紅,不含碳酸氫鈉

RPMI1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基,不含 L-谷氨酰胺,不含碳酸氫鈉

RPMI1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含 L-谷氨酰胺,含 HEPES,不含碳酸氫鈉

RPMI1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基,高壓滅菌型,不含 L-谷氨酰胺,不含碳酸氫鈉

產(chǎn)品規(guī)格

干粉(1L, 10L 及 100L); 液體(500 ml)

配制方法

干粉培養(yǎng)基的過(guò)濾配制

1 將 1 升量的干粉在 950ml 細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)純凈水中*溶解

2 加入 2 克碳酸氫鈉,繼續(xù)攪拌至*溶解

3 用 1N 鹽酸或 1N 氫氧化鈉調(diào)整到要求的 pH,并將溶液體積調(diào)至1000ml

4 在超凈臺(tái)內(nèi)用 0.22um 濾膜負(fù)壓過(guò)濾

5 將培養(yǎng)基在 2~8℃避光保存

高壓滅菌型的配制

1 將 1 升的高壓滅菌型干粉在 900ml 細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)純凈水中*溶解

2 將溶液 pH 調(diào)至 4.0 并將溶液體積調(diào)至 960ml

3 在 121℃,15psi 高壓消毒 5 分鐘

4 將培養(yǎng)基迅速取出,避免過(guò)久加熱引起成份分解或液體蒸發(fā)減少

5 待培養(yǎng)基冷卻至室溫后,無(wú)菌操作加入 29.3ml 的無(wú)菌 7.5%碳酸

氫鈉溶液,及 10ml 的無(wú)菌 200mM L-谷氨酰胺

6 如有必要,用無(wú)菌的 1N 鹽酸或 1N 氫氧化鈉調(diào)整 pH

7 將培養(yǎng)基在 2~8℃避光保存

自備材料  

細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)或注射級(jí)純水  

7.5%碳酸氫鈉溶液(無(wú)菌)  

200mM 谷氨酰胺溶液(無(wú)菌)  

1 N 鹽酸溶液(無(wú)菌)  

1 N 氫氧化鈉溶液(無(wú)菌)

質(zhì)檢指標(biāo)  

形狀:淡黃色均勻粉末(干粉),澄清透明(液體)  

溶解:干粉按要求溶解后澄清透明  

pH 值:(加碳酸氫鈉前)4.4-5.0(加碳酸氫鈉后)(液體)7.4-8.0  

滲透壓:(加碳酸氫鈉前)230-270(加碳酸氫鈉后)280-320 (液  體)  

菌落:每克小于 100cfu (干粉),無(wú)菌(液體)  

細(xì)胞生長(zhǎng):正常(干粉及液體)

儲(chǔ)存及注意事項(xiàng)

1 所有的液體及干粉培養(yǎng)基應(yīng)在 2~8℃避光保存,并在有效期內(nèi)使用。

2 щ 倇或沉淀。

3 液體培養(yǎng)基的 pH 儲(chǔ)存時(shí)會(huì)因?yàn)槎趸嫉奶右荻l(fā)生改變。建議盡量減少開瓶次數(shù)。

4 滅菌后的液體培養(yǎng)基添加物應(yīng)無(wú)菌并在無(wú)菌操作下添加。

5 干粉培養(yǎng)基吸濕性強(qiáng),極易吸水變質(zhì)。粉包打開后應(yīng)全部使用或剩余舍棄。

注意:

本產(chǎn)品于研發(fā)生產(chǎn)使用。

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